Este trabajo fue presentado en el I Congreso Internacional para la optimización de modelos de animales de experimentación. Valdivia, Chile del 24 al 26 de enero de 2012.
Podaza E.A1, Marquez J.2, Battista S.D1, Chisari A.N.1
1Instituto de Investigaciones Biológicas, Universidad Nacional de Mar del Plata, Argentina
2 Dra. Judith Márquez. Especialista en Bioquímica Clínica. Jefa a cargo Química Clínica - Proteínas. DT Instituto de Análisis Fares Taie. Rivadavia 3331 - (0223) 475-3855 Int: 132 - Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina. quimica@farestaie.com.ar
Los individuos empleados para este estudio fueron mantenidos en el bioterio del IIB libres de stress, con comida y agua ad-libitum y con condiciones de temperatura y luz controladas. Se utilizaron hembras de 3 meses de edad cuyo comienzo de preñez se consideró al encontrar espermatozoides en el lavado vaginal. A partir de ese momento se las alimentaron con una dieta con 8% de proteínas, en el caso del grupo malnutrido o con 20% de proteínas en el caso de los controles, durante la gestación y lactancia. La dieta se formula según The experimental Animal Nutrition Committee, AIN-93.
Se registró el peso corporal y la tasa de consumo diario del alimento de las madres a lo largo de la gestación.
A los 24 días de nacidos las crías fueron anestesiadas en cámara de CO2. Se registró el peso corporal y se les extrajo sangre mediante punción cardiaca. Posteriormente fueron sacrificadas en la misma cámara y se disecó el hígado, cuyo peso se analizó.
Se procedió a la obtención del suero para las determinaciones bioquimicas. Las mismas se realizaron mediante autoanalizador 912 Hitachi de Roche.
El daño hepático se evalúo mediante el análisis de los niveles séricos de glutámico oxalacético transaminasa (GOT), glutámico pirúvico transaminasa (GPT), fosfatasa alcalina (FA), proteínas totales, colesterol y albúmina (ALB).
Pesos corporales y tasas de consumo de alimento diarias
Los datos obtenidos del registro de los pesos maternos a lo largo de la gestación no mostro diferencias estadísticamente significativas entre ambos grupos (valor estadistico: 0,67; p< 0,05).
En cuanto a las tasas de consumo de alimento diarias tampoco exhibieron diferencias estadísticamente significativas. (valor estadistico: 0,61; p<0,05).
Pesos corporales y hepáticos de las crías a los 24 días de nacidos.
Los pesos corporales registrados fueron mayores en las crías del grupo control. Se observó, que, contaban con mejor aspecto en general. (Las crías malnutridas exhibieron alopecia y o el pelo no presentaba aspecto saludable cuando las comparamos con las crías controles). La diferencia fue estadísticamente significativa. (valor estadístico: 0,031; p<0,05)
Los pesos de los hígados mostraron un resultado similar, para el caso de los controles estos eran de mayor peso, mientras que los correspondientes a los malnutridos fueron de menor peso y de color más pálido. La diferencia en este caso también fue significativa. (Valor estadistico:0,00091;p<0,05)
No se observo dimorfismo sexual en ninguno de los casos.
Determinaciones bioquímicas
A partir del análisis de los parámetros determinados en el suero, los resultados que se obtuvieron mostraron diferencias significativas entre ambos grupos, siendo menores en animales malnutridos los valores de glucosa, albumina y proteínas; y mayor para colesterol, fosfatasa alcalina, TGO y GPT con respecto a los correspondietes en el grupo control.
Las diferencias en los registros de peso corporal y de hígado, sumada a las diferencias en el pelaje, en la morfología del órgano y los parámetros bioquímicos de función hepática analizados, dan un indicio de la magnitud de los efectos generados por la malnutrición proteica durante la gestación y lactancia. Dichas observaciones macroscópicas groseras fueron reforzadas por los valores de parámetros bioquímicos que dieron a conocer una falla en la función hepática ya presente a los 24 días de nacidos (destete). Estos resultados refuerzan la hipótesis de la importancia del ambiente intrauterino y su relación con el riesgo de padecer enfermedades en etapas adultas. Seria de esperar que al exponer durante mas tiempo a las crías a una dieta deficiente en proteínas o someter durante la gestación a las madres a una dieta que contenga menos del 8% proteínas los daños en la fisiología del hígado fueran mayores.